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上海實驗-細胞周期實驗

簡要描述：上海實驗服務-細胞周期實驗是上海達為科生物的基礎服務項目之一，由細胞平臺經(jīng)驗豐富的實驗人員操作完成。

  • 更新時間：2022-12-23
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詳細介紹

　　上海實驗細胞周期實驗是上海達為科生物的基礎服務項目之一，由細胞平臺經(jīng)驗豐富的實驗人員操作完成。
 
　　(1)收集對數(shù)生長期細胞:棄除舊培養(yǎng)基，用PBS洗滌細胞加入適量胰酶進行消化。加入新鮮的培養(yǎng)基吹打細胞，并將細胞收集于標記好的對應離心管中，室溫1000 rpm離心5 min棄除.上清液。
 
　　(2)洗滌細胞:用預冷的PBS重懸上述細胞沉淀，室溫1000 rpm離心5 min將上清液棄除。
 
　　(3)固定細胞:將細胞用0.5 ml預冷的PBS溶液重懸，加入預冷的70%乙醇溶液在4°C固定過夜。
 
　　(4) PI染色細胞:加入10μl RNase ( 10mg/ml) ，置37 C、5% CO2、飽和濕度恒溫培養(yǎng)箱孵育30min,運用冰浴終止RNase A酶作用;再加入10μ1溴化乙錠(PI， 1mg/ml) 染色，置37 C、5% CO2、飽和濕度恒溫培養(yǎng)箱孵育30min.
 
　　(5)流式細胞儀檢測，分析PI熒光的直方圖。
 

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